摘要：目的 探讨血清肿瘤标志物人附睾蛋白4(hum an epididym is protein HE4)及CA125在诊断卵巢恶性中的特异性及临床价值。方法 选择50例卵巢癌，，50例卵巢良性疾病，50例健康体女性分为三组。用全自动电化学发光法分别检测三组中的血清CAl25和HE4含量。结果 卵巢癌组HE4和CA-l25水平显著高于其他两组，经统计学处理差异显著（P<0.01)。健康对照组和良性疾病组HE4比较无显著差异(P>0.05)。以卵巢良性疾病作参照，单独检测血清HE4水平对卵巢癌诊断的敏感性为57.6%，低于单独检测CAl25的77.2%；但其特异性为97.0%，高于CAl25的85.0%。以二者其中之一高于参考值即视为阳性时，联合检测HE4和CAl25对卵巢癌诊断的敏感性为94.6%，特异性可达85.0%。结论 HE4的特异性高于CA-125但CA-125的灵敏度大于HE4，若联合检测血清CA125和HE4将有助于卵巢肿瘤的良恶性鉴别与诊断。
关键词：附睾上皮分泌蛋白4(HE4)；CA125卵巢癌；电化学发光
近年来国外报道全球卵巢恶性肿瘤发病率呈逐年递增，且是女性最常见的恶性肿瘤之一。其发病率在女性生殖系统肿瘤中排第3位，但死亡率占据妇科恶性肿瘤之首。我国妇女卵巢癌的发病率同样呈快速上升趋势，严重影响和威胁女性健康的恶性疾病[1]。目前检测的卵巢肿瘤标志物包括CA-125、、CEA、SCC等，但被广泛应用于临床卵巢癌筛查、诊断、疗效和预后判断的只有CA-125。但CA125由上皮细胞组织病变产生，任何上皮组织病变都可使其结果升高[2]，据文献报道妇科良性疾病;子宫内膜异位症可导致血清CA-125的结果不同程度的升高，因此CA-125在卵巢癌和卵巢良性疾病鉴别诊断中缺乏高度特异性。笔者经检测CA-125也验证此观点，为寻找一种高特异性的血清学肿瘤标志物显得尤为重要。Hellstrom等[3]报道，人附睾分泌蛋白4(hum an epididym js prote in 4HE4)在卵巢癌组织中具有高度特异性，但在正常卵巢组织中无表达，其诊断卵巢癌的敏感性和特异性均优于CA-l25可用于卵巢癌的诊断。笔者用电化学发光法分别测定卵巢癌患者血清CA125和HE4水平，探讨二种标志物在女性卵巢癌和卵巢良性疾病中的诊断价值，以便对二者做一个方法学评价。
1材料与方法
1.1研究对象 选择 2008年1月至2011年7月经本院术后病理学确诊的卵巢癌患者，并将患者分为卵巢癌组、卵巢良性疾病组及正常对照组。其中卵巢癌组90例，年龄17～69岁，平均54岁。卵巢良性疾病组50例（子宫内膜异位症、卵巢囊肿等），年龄16～65岁，平均45岁。50例健康对照均为我院体检中心体检合格的健康妇女，无心、肝肺、胃等重要脏器的疾病，肝、肾功能正常，妇科影像学检查正常。年龄21～70岁，平均45岁。
l.2方法 三组受检者均采用安徽赫尔一次性真空负压采血管，空腹静脉采血5ML，经低速离心机4000转3分钟分离血清，随机检测，并-20保存血清。血清HE4及CA-125分别用美国雅培公司的IS-2000型全自动化学发光分析仪，原装配套试剂。操作均按照试剂和仪器说明书进行并加做室间质控。
l.3统计学分析计量资料用x±s表示。各组间比较采用配对t检验。所有统计学处理均采用SPSS11.5软件完成，以p<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1血清HE4和CA-l25水平测定 结果见表1。卵巢癌组HE4和CA-125水平明显高于其他两组，差异有统计学意义(P<0.01)，而健康对照组和良性疾病组比较HE4无统计学差异(P>0.05)，CA-125两组差异显著(P<0 0.01)。
2.2 HE4水平的分布 将血清HE4水平分为<75、75-100、101～150和>150 pmol／L 4个水平段，3组人群在4个水平段中的数量分布见表2。
2.3血清HE4诊断特性分析 为确定血清HE4的参考值，本研究以卵巢良性疾病为参照，将血清HE4分为50、75、100和150pmol／L 4个水平上限，观察其对卵巢癌的诊断特性。由表3可以看出，以75pmol／L为cut off瞄，>75 pmol／L为阳性时，HE4对卵巢癌诊断效率最高。因此，我们将血清HE4和CAl25参考值分别设定为0～75 pmol／L和0～35 iu／ml并以卵巢良性疾病为参照，对单独检测血清CAl25、HE4及联合检测CAl25+HE4水平在卵巢癌诊断中的敏感性特异性及阴性、阳性预测值作比较。从表4中可以得出，单独检测血清CA125水平对卵巢癌诊断的敏感性为77.2%，高于HE4的57.6%,但特异性HE4为97.0%，明显高于CAl25的85.0％。在联合检测血清HE4+CAl25时，以二者其中之一高于参考值即视为阳性，特异性可达85.0%，检测的敏感性(94.6%)和诊断效率(89.8%)均高于单独检测其中的任意一项。
3讨论
CAl25作为一种肿瘤标志物已被广泛用于临床卵巢癌的诊断，但由于卵巢良性与恶性疾病、子宫内膜异位症盆腔炎、胸腹膜炎和肝。肾疾病等均会导致血清CA125升高，所以应用CA125诊断卵巢癌并不准确，有时还会导致不必要的手术。因此，需要更加敏感和特异的血清肿瘤标志物来替代。 HE4属于染色体20q2-13.1位置上14个同源基因之一，这些同源基因编码含有乳清酸型4个二硫键核心域的蛋白质[4]。人附睾分泌蛋白4(HE4)首先在附睾远端的上皮中被发现，并且最初认为它是一种与精子成熟相关的蛋白酶抑制剂[5-6]。随后发现HE4在多个正常组织，包括呼吸道上皮和生殖道组织中表达[7-8]。另有报道,多种肿瘤细胞系包括卵巢癌、肺癌、结肠癌和乳腺癌等高水平表达HE4。93％浆液性上皮卵巢癌、100%子宫内膜上皮癌和50％透明细胞卵巢癌高表达HE4，而黏液性卵巢癌却不表达HE4[9]。HE4除了在细胞上表达，己在卵巢癌患者的血清中检测到有高水平分泌型HE4[10]。在一项关于卵巢癌患者与健康者、良性状态人群的病例组对照组对比性研究中，H ellstrom[3]发现HE4在卵巢癌患者血清中高水平表达。国外已将血清HE4用于卵巢癌诊断的研究[11]，Moore等[15，16]和Hellstom等[17]就血清HE4应用于卵巢癌的诊断和监测展开了大量的研究并认为HE4是最有用的卵巢癌标志物之一[8,12,14]。
本研究结果显示，卵巢癌组HE4和CA125水平均明显高于卵巢良性疾病组和健康对照组。在以良性卵巢疾病患者为参照时，本研究将血清HE4参考值设定为0～75 pmol／与文献报道的血清HE4采用的正常参考范围分别为0 ～70.0 pmol／L18]。在此参考值下，单独检测HE4对卵巢癌的诊断效率最高。结果表明，单独检测血清CA125水平对卵巢癌诊断的敏感性(77.2%)要高于HE4(57.6%)，但HE4的特异性(97.0%)要明显高于CA125(85.0%)。在良性疾病子宫内膜异位症中CA-125出现非特异性的假阳性，而HE4在卵巢癌中出现假阴性造成漏检。若联合检测血清HE4和CA125时，诊断特异性为85.0%，但检测的敏感性(94.6%)和诊断效率(89.8%)均高于单独检测其中的任意一项。说明HE4在鉴别诊断良恶性肿瘤优于CA-125，但CA-25在筛查及术后的预后判别优势大于HE4的检测。
总之实验表明，肿瘤标志物的检测是以联合为基础，以单项优势相互补为原则，联合检测血清HE4和CA125水平可以提高卵巢癌诊断的敏感性和诊断效率，减少误判，为临床最大的提供诊断依据。在卵巢良恶性肿瘤诊断和鉴别诊断中检测血清HE4可作为检测CA-125之后的良好指标。HE4检测在中国人群中尚未广泛应用，笔者认为检测HE4有助于卵巢癌的早期诊断，可进一步提高卵巢癌诊断的敏感性和特异性。随着对HE4的广泛深入研究，它在卵巢癌的发病风险预测、治疗监测、预后判断以及高危人群的随访等方面均会有重要的临床价值。
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